1.取樣
拿到樣品后用毛細(xì)管蘸取少量的樣品放入離心管中,加入相應(yīng)的溶劑將樣品溶解,標(biāo)號(hào)后作為對(duì)照。
2.跑板
將取出的樣品與要分離的樣品點(diǎn)在同一塊硅膠板上進(jìn)行跑板,確定第幾個(gè)點(diǎn)是將要分離出來的樣品。
3.裝柱
將少量的棉花(棉花太少會(huì)露出硅膠,太多過濾的較慢)塞入柱子低端防治硅膠露出,配制硅膠溶劑時(shí)濃度應(yīng)適當(dāng)(濃度過大易造成干柱,溶度過小會(huì)大量浪費(fèi)溶劑),將硅膠裝入柱子直徑的15—20倍高即可(柱子過高浪費(fèi)時(shí)間且沒有必要,柱子過低會(huì)造成物質(zhì)沒有分離開就應(yīng)經(jīng)被洗下)。
倒入一定量的硅膠之后將硅膠壓實(shí),然后將溶液壓**和硅膠面向近處,重復(fù)加入硅膠到達(dá)預(yù)定的高度,然后加入一定量的無水硫酸鈉(作用是防治在加樣時(shí)將硅膠面沖的變形),然后用手稍微彈動(dòng)柱子將無水硫酸鈉彈平,在溶劑將柱內(nèi)壁的硅膠及無水硫酸鈉洗凈。
4.加樣
將樣品用溶劑溶解后加入柱內(nèi)(加入溶液時(shí)從中間像外圈旋轉(zhuǎn)滴加,不要將柱面沖出坑),并用溶劑反復(fù)洗瓶子3遍左右(洗瓶子時(shí)將溶劑沿磨砂口加但不能碰到瓶?jī)?nèi)壁,否則會(huì)污染試劑),將洗后的液體轉(zhuǎn)移**柱子內(nèi)。
5.過柱
先用滴管沿柱內(nèi)壁加入溶液,溶液到達(dá)一定高度后再將配制的溶液倒入到柱子上面的球型漏斗內(nèi),加壓,先用錐形瓶接取前面柱內(nèi)的溶劑,然后當(dāng)溶液到達(dá)一定的高度時(shí)開始用試管接,然后不斷的檢驗(yàn)試管中是否有樣品洗出,當(dāng)從有樣品洗出到?jīng)]有時(shí),**個(gè)樣品就被*洗出,跳躍的點(diǎn)一定數(shù)量的點(diǎn),然后進(jìn)行跑板,確定沒有自己要分離的樣品后就可以倒掉,繼續(xù)洗柱子。換取極性稍大的溶劑,分離到第二個(gè)樣品后同**個(gè)做同樣的處理,直**得到自己要的樣品。
6.旋干
將的的樣品轉(zhuǎn)移**圓底瓶中旋干,在將樣品瓶安裝好后,先打開冷凝系統(tǒng)和加熱系統(tǒng),然后打開旋轉(zhuǎn)和抽氣,緩慢關(guān)閉活塞,此時(shí)不停的觀察是否有氣泡,若有氣泡應(yīng)放入一定氣體,然后緩慢關(guān)閉直**沒有氣泡,旋干后用油泵抽氣(油泵的真空度比選轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀的真空度更大,能抽的更干)然后放入稱量過質(zhì)量的小瓶中,封口后放入冰箱內(nèi)保存。